四(sì)川羊肚(dù)菌菌种(zhǒng)生产基地浅谈羊肚菌菌种的培育方法
发(fā)布日期(qī):2019-05-06
本技(jì)术公(gōng)开(kāi)了一种中(zhōng)药材的优质高产种植方(fāng)法(fǎ)。该方法(fǎ)包括以下步骤:(1)母种的制作及培养,包括①制(zhì)作母种培养基:将(jiāng)250g土豆、30g琼脂(zhī)、25g葡萄糖和(hé)3g维(wéi)生素B放(fàng)入2000ml的(de)水(shuǐ)中(zhōng)加热,直至琼脂完全煮化即得母种(zhǒng)培养基(jī),②培育母种(zhǒng):将试管(guǎn)放入密封的无菌接种箱(xiāng)中,每个试管中接入1cm×1cm的菌丝后,置于20℃培养箱中,直至生长成母(mǔ)种;(2)原种的制作及培养,包括①制作原种培养基:取小麦80%、木销10%和麦麸10%,将所(suǒ)述小麦煮熟后捞出,与所述木(mù)销和麦(mài)麸搅拌(bàn)均匀,水分控制在60-80%,100℃下保温6小时,②培育原种;(3)栽培中的制作及培(péi)养,包括①制作栽培种培养基和②培(péi)育(yù)栽培(péi)种。本技术中,培育出优良的羊肚菌菌种,提高了种植的存活率。
具体(tǐ)实施方式
一种羊肚菌菌种的培育方法,该(gāi)方法包括以下步骤:
(1)母(mǔ)种(zhǒng)的制作及培养
①制作母种培养基:将250g土豆,30g琼脂,25g葡萄糖和3g维生素B放(fàng)入2000m1
的水中加热,直至琼脂(zhī)完全煮化即得(dé)母(mǔ)种培(péi)养基(jī);
②培育母种:取所述母(mǔ)种培(péi)养基 200ml装入300ml的试管中,用棉花塞住管口(kǒu),将所(suǒ)述试管放在125℃的高压灭菌锅(guō)内灭菌1. 5h冷(lěng)却至(zhì)室温后(hòu),将所述试(shì)管放入(rù)密封的无菌接种箱中,每个试管中(zhōng)接入1cmX 1cm的菌丝后,置于20℃培(péi)养箱中(zhōng),直(zhí)至(zhì)生长(zhǎng)成母(mǔ)种。
在步(bù)骤(1)中,土豆需(xū)要(yào)预(yù)先放入(rù)水中煮半小(xiǎo)时,之(zhī)后将(jiāng)其捞山,再与琼脂、葡萄糖、维(wéi)生素B一起(qǐ)放入水中煮,直(zhí)至琼脂煮(zhǔ)化,将煮好的培(péi)养基放在试管里,等凝固之(zhī)后,再用棉花寒住试(shì)管的管口。进行母种的培育时,在将试管放(fàng)入接种箱之前,还需要用75%的酒(jiǔ)精擦拭试管,对试(shì)管的外壁(bì)进行洒精消(xiāo)毒。
在将试管放进无菌接种箱内时(shí),还需(xū)要(yào)将用于接种的下其(qí)一同放进接种箱(xiāng)的,如:托盘、酒(jiǔ)精灯(dēng)、打火(huǒ)机、器皿、接(jiē)种(zhǒng)钩、镊(niè)子等(děng)一起放入接种(zhǒng)箱内进行消毒处理.对(duì)于接种箱内的消毒处理,可以将装有高锰酸钾和甲醛混合物的被子放(fàng)入接(jiē)种箱(xiāng)内(nèi),消毒时保证接种箱的密封(fēng)。
(2)原种的(de)制作(zuò)及培(péi)养
①制作(zuò)原种培养基:以(yǐ)质量(liàng)分数计,取小麦80
%、木销10%和(hé)麦麸10%,将所述小麦(mài)煮熟后(hòu)捞出,与所述木销(xiāo)和麦数搅拌(bàn)均匀,水分控制在60-80 %
,装(zhuāng)入培养瓶中(zhōng),瓶(píng)口用棉花塞住,将所述培养瓶放在火菌锅(guō)里(lǐ)火菌(jun1)后(hòu),100℃下(xià)保温6小时,取出冷(lěng)却后即得原种培养(yǎng)基;
②培育原种:将所述培养瓶和装有母种的(de)试(shì)管放入接种(zhǒng)箱中密封半小(xiǎo)时(shí)后,再将试管中的毋种接(jiē)入到所述原种培养基的(de)培养瓶中,保(bǎo)持温度(dù)20℃即(jí)可。
(3)较培(péi)中的制作(zuò)及培养
①制作栽培种培(péi)养基:以质量分数计,取小(xiǎo)麦(mài)75%煮熟(shú)后(hòu)捞出,放入15%木(mù)销(xiāo)、
5%麦麸和5%泥上(shàng)搅拌均匀(yún),含水(shuǐ)量60% -80%.装入聚丙烯袋中封口,将(jiāng)所述聚丙烯(xī)袋放(fàng)在(zài)灭菌锅里(lǐ)灭菌.常压100℃下保存4小时,取出冷却至室(shì)温:
②培育栽培种(zhǒng):将所述聚丙烯(xī)袋和(hé)原种培养基的培养瓶置于接种箱中密封半(bàn)小时(shí)后,再将步骤(2)培养的原种接(jiē)入到所述(shù)聚丙烯袋(dài)巾,在20℃环境(jìng)下培养15-20天(tiān)可(kě)获得(dé)栽(zāi)培(péi)种。
在上述的步骤(1)之前(qián),还需要(yào)采集新鲜(xiān)的羊肚菌子实(shí)体,将(jiāng)子实体切成直(zhí)径(jìng)
2-3mm的菌块,取经(jīng)过高压灭菌的PDA培(péi)养纂(zuǎn),将所(suǒ)述菌块放(fàng)在PDA培(péi)养(yǎng)基上,将所述PDA培养基置于20℃的培养箱中,,周后可获得菌丝。
在本方案中(zhōng),接种箱始终处于无菌状态,在进行培养(yǎng)基的接种处(chù)理时,在接种箱内放入一杯装有(yǒu)高锰酸(suān)钾和甲醉的混合(hé)液体,用于对接种箱内的空气进行杀菌消毒处理。
与现有技(jì)术相比.本(běn)技术实施例具(jù)有以(yǐ)下(xià)优点(diǎn):
通过应用本技术实(shí)施例的技术方案,在(zài)羊肚菌菌种的(de)培育过程中,通过对现有技术中(zhōng)的培养基(jī)配方进行(háng)改进,在菌种培育的各阶(jiē)段采用不同的培养(yǎng)基(jī)达(dá)到最好的培育效果,木方案(àn)提供的菌种培育方法(fǎ),培育出(chū)的羊肚(dù)菌(jun1)菌种品质优良,同时,大大提(tí)高了羊肚菌种植(zhí)的存活率。
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